ТСХ — это разновидность жидкостной адсорбционной хроматографии, в которой подвижная фаза перемещается по слою неподвижной фазы, нанесенной тонким слоем на пластинку, за счет капиллярных сил. Благодаря простоте использования и информативности ТСХ широко используется для определения наркотиков, лекарственных средств, взрывчатых веществ, красителей, пищевых продуктов, ССЖ и др., а также для сравнения структурно-группового состава объектов при идентификационных исследованиях.
При ТСХ слой адсорбента наносят на стеклянные (пластиковые или из металлической фольги) пластинки. В отличие от колоночной хроматографии применяемые в ТСХ адсорбенты содержат связывающие агенты, например сернокислый кальций, способствующие фиксации слоя на поверхности пластинки.
Пластинки, содержащие слой адсорбента 0,25 мм, используются для качественного анализа исследуемых проб, а для препаративного разделения смесей веществ используют пластинки с слоем адсорбента до 5 мм.
Эффективность разделения можно повысить с помощью двухмерной хроматографии. В этом случае пробу наносят в виде отдельного пятна в нижний угол пластинки и проводят разделение в одном направлении. Затем пластинку вынимают из камеры, высушивают, после чего хроматографируют в другой системе растворителей в направлении, перпендикулярном первому.
Многие фирмы, выпускают пластинки для ТСХ, адсорбент которых содержит флуоресцирующее вещество. После разделения пластинки просматривают в УФ свете, и отдельные компоненты выявляются в виде темных пятен (синих, зеленых).
Если адсорбенты не содержат красителей, то положение соединений на пластинке определяют другими методами: опрыскивают пластинку 50%-ным спиртовым раствором серной кислоты и при последующем нагревании большинство соединений обугливаются, образуя коричневые пятна (универсальный метод), или опрыскивают специфическими соединениями, взаимодействующими с определяемыми реагентами с образованием окрашенных соединений (нингидрин, йод и др.). Люминесцирующие вещества обнаруживают на пластинке при просмотре в УФ-свете.
Основная характеристика метода ТСХ – это относительная хроматографическая подвижность зоны (пятна) (Rf), которая определяется как отношение расстояния пройденного пятном от старта к расстоянию, пройденному фронтом растворителя.
