Сущность явления люминесценции заключается в том, что при поглощении различных видов энергии (световой, электрической и др.) молекулами некоторых веществ их атомы переходят в возбужденное состояние, а затем, возвращаясь в исходное состояние, выделяют поглощенную энергию в виде светового излучения. В РИФ люминесценция проявляется в виде флуоресценции — это свечение, возникающее в момент облучения возбуждающим светом и прекращающееся сразу после его окончания. Многие вещества и живые микроорганизмы обладают собственной флуоресценцией, однако интенсивность ее очень мала. Вещества, обладающие интенсивной собственной флуоресценцией и используемые для придания флуоресцирующих свойств не флуоресцирующим веществам, получили название флуорохромы. Такая наведенная флуоресценция называется вторичной. Для возбуждения флуоресценции при люминесцентной микроскопии чаще всего используют ультрафиолетовую часть спектра
Флуорохромирование — это обработка препаратов флуорохромом с целью увеличения силы и контрастности свечения их.
Методика приготовления и окрашивания препаратов: готовят на предметных стеклах мазки, препараты подсушивают и фиксируют в охлажденном ацетоне при комнатной температуре или при минус 15°С окрашивают по прямому или непрямому методу; ведут учет под люминесцентным микроскопом.
Достоинства РИФ: высокая специфичность и чувствительность; простота техники постановки; требуется минимальное количество компонентов. Это экспресс-метод диагностики, так как в течение нескольких часов можно получить ответ. К недостаткам можно отнести субъективизм в оценке интенсивности свечения и, к сожалению, иногда флуоресцирующие сыворотки бывают плохого качества. В настоящее время РИФ широко применяют в диагностике вирусных болезней животных.
