Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат: кровь (лучше брать на 3–5 сут болезни при повышенной температуре тела), моча, кусочки паренхиматозных органов, почка, транссудат из грудной и брюшной полостей, мочевой пузырь с содержимым, абортированный плод. Патологический материал отбирают не позже 2 ч после гибели животного. Мочу собирают при естественном мочеиспускании; в летнее время исследуется не позднее 3 ч после взятия.
Микроскопия: исследуют мочу, цитратную кровь, ткани. Суспензию из коркового слоя почки, печени; у плода — из всех органов. Микроскопию проводят в раздавленной капле с конденсором «темного поля». Типичные лептоспиры активно подвижны и имеют форму прямой или S-образной с загнутыми в виде крючков концами серебристо-белой нити. Лептоспир также можно обнаружить в срезах из органов после импрегнации серебром по методу Левадити.
Выделение культур: материал засевают по 1–3 капли в 3–5 пробирок со специальной питательной средой и инкубируют при 28–300С в течение 3 мес. Лептоспиры начинают размножаться через 7–20 сут, иногда через 1–2 и очень редко — через 3 мес. Наличие роста определяют темнопольной микроскопией раздавленных капель на 3, 5, 7, 10#е сутки и далее через каждые 5 сут. При обнаружении размножения лептоспир делают пересев в 3–5 пробирок со свежей средой. Выделить культуры лептоспир удается не всегда.
Биологическая проба: метод более чувствительный, чем культуральный; проводится с целью выделения и очистки куль тур лептоспир, определения их вирулентности и дифференциации от сапрофитов. Заражают 20–30 суточных золотистых хомяков и крольчат-сосунов в возрасте 10–20 сут. Каждую пробу испытывают на двух животных; на 4–5е сутки убивают первое, на 14–16-е сутки — второе, если оно не погибло раньше. Из сердца, печени и почек убитых или павших животных проводят посевы. Сыворотку крови убитого через 14–16 сут животного исследуют в реакции микроагглютинации (РМА) с лептоспирами 13 серогрупп. Положительная РМА в разведении 1:10 и выше указывает на наличие лептоспир в исследуемом материале.
