Для диагностики туберкулеза при жизни исследуют: мокроту (бронхиальную слизь), молоко, фекальные массы, реже — мочу, вагинальную слизь и сперму животного. От убойных животных исследованию подвергаются лимфатические узлы и паренхиматозные органы.
Возбудитель тубика кислото-спирто-щелоче устойчивый, что обусловлено наличием стеариновых оболочек и других воскоподобных веществ оболочке придают клетке гидрофобность - отталкивают воду и водные красители.
Для окрашивания мазков используют чаще всего метод Циля - Нильсона. Окрашиваются в розоватый цвет, грамм +
Для бактериологического исследования в лабораторию направляют от млекопитающих лимфатические узлы: заглоточные, подчелюстные, бронхиальные, средостенные, портальные, брыжеечные, взятые в области илеоцекального соединения и подвздошной кишки; кусочки органов с подозрительными на туберкулез изменениями. Парные лимфатические узлы вырезают с обеих сторон туши, указав их название на этикетке, которую упаковывают вместе с пробой. Тушки (трупы) птицы и мелких животных для исследования направляют в лабораторию целиком.
Пробы патологического материала, отобранные для бактериологического исследования, доставляют в лабораторию в свежем или замороженном виде. Допускается консервация проб 30%-м стерильным водным раствором химически чистого глицерина. В лаборатории проводят бактериологическое исследование материала, включая микроскопию, выделение чистой культуры и заражение лабораторных животных.
Для микроскопического исследования из каждого органа и лимфатического узла готовят по 2 мазка, которые окрашивают по Цилю-Нильсену. Для люминесцентной микроскопии мазки окрашивают смесью флуорохромов. Патматериал для культурального и биологического исследований обрабатывают методом Гоне-Левенштейна-Сумиоши или методом Аликаевой. Для выращивания микобактерий туберкулеза используют плотные яичные, питательные среды Левенштейна-Йенсена, Гельберга и Петраньяни.
Биологическое исследование (биопробу) применяют для обнаружения возбудителя болезни в исследуемом материале и определения его видовой принадлежности. Для биопробы используют морских свинок, кроликов и кур. Диагноз на туберкулез считают установленным окончательно в одном из следующих случаев:
- при обнаружении в органах и тканях изменений, типичных для туберкулеза (только у крупного рогатого скота);
- при выделении культуры возбудителя туберкулеза бычьего или человеческого видов;
- при получении положительных результатов биологической пробы.
Кроме того, разработаны методы диагностики туберкулеза с применением ИФА и ПЦР, позволяющие проводить прижизненную диагностику болезни путем исследования крови или бронхиальной слизи, а также с использованием среды ВКГ с последующей дифференциацией выросших на ней микобактерий.
