Окраска по Граму относится к сложному методу окраски, позволяет выявить различия химического состава бактериальной клетки. Желательно использовать контроль: проводить параллельное окрашивание известных Грам+ и Грам- микроорганизмов.
Для приготовления мазка используют культуру с жидкой или плотной средой. Необходимо использовать клетки суточных культур:
- Высушить препарат, фиксировать и окрашивать генцианвиолетом 1-2 мин;
- Сливают краситель и обрабатывают препарат 1-2 мин раствором Люголя до почернения;
- Сливают раствор Люголя и обесцвечивают 0,5-1 мин 96%-м этиловым спиртом;
- Промывают слабой, идущей под углом струе водопроводной воды;
- Окрашивают 1-2 мин водным фуксином;
- Промывают водой;
- Препарат высушивают и микроскопируют под иммерсией при 90
В правильно окрашенном препарате на чистом фоне четко выделяются клетки: Грам+ имеют сине-фиолетовый цвет, Грам- розово-красный.
