В его основу положено маркирование Аг(агглютиноген) или Ат (агглютинин) , вступающего в реакцию, ферментом. Воздействие метки с субстратом обычно сопровождается изменением окраски среды. Наибольшее распространение получил гетерогенный ИФА на твёрдой фазе (твердофазный). Различают:
ПРЯМОЙ ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА. В этом случае: сыворотку с Ат инкубируют с Аг, фиксированным на твёрдом субстрате (чаще всего это пластиковая микропланшетка).
Ат, не связавшие Аг, удаляют многократным промыванием.
Вносят меченную ферментом сыворотку к Ат, связавшим Аг.
Определяют кол-во фермента–маркёра, связавшегося с Ат.
КОНКУРЕНТНЫЙ ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА. Вносят сыворотку. Если в ней есть специфические Ат, то они связываются с Аг, фиксированном на твёрдом субстрате. Если специфических Ат нет, то Аг оказывается не связанным.
При добавлении специфических к фиксированному Аг Антител в первом случае им будет не с чем взаимодействовать (большинство Аг уже связаны) ,т.к. содержание маркёра низкое. Во втором случае специфические Ат будут связываться с Аг и при отмывании они не будут смываться, т.к. высокое содержание маркёра.
Этот метод позволяет непосредственно регистрировать их взаимодействие с Ат, а не вторичные проявления (агглютинацию, преципитацию или гемолиз). Метод очень ЧУВСТВИТЕЛЕН.
Определяют: Хламидии, клостридии, ВИЧ и др.
