Сущность РЗГА заключается в том, что при взаимодействии противовирусной иммунной сыворотки с соответствующими штаммами вируса происходит задержка (торможение) гемагглютинирующей способности вируса. На результат РЗГА влияют неспецифические ингибиторы гемагглютинации, содержащиеся в сыворотках крови. Они обладают способностью вступать в связь с вирусами и тормозить гемагглютинацию. С целью ликвидации отрицательного влияния ингибиторов на ход реакции их необходимо разрушить (удалить) с помощью СО2(углекислоты), фильтрата холерного вибриона, каолина, периодата калия. Компоненты РТГА: исследуемый вируссодержащий материал; диагностическая иммунная сыворотка; 1%-ная взвесь эритроцитов. Постановка РЗГА включает следующие этапы: определение рабочей дозы вируса (1 ГАЕ), определение правильности выбора 4 ГАЕ и проведение основного опыта РЗГА.
Основной опыт РЗГА. В лунки пластмассовой панели разливают по 0,1 мл физиологического раствора. Затем в первую лунку вносят 0,1 мл диагностической иммунной сыворотки и делают последовательные ее переносы. Из последней лунки 0,1 мл разведенной сыворотки выливают в дезраствор. Таким образом, получают разведения исследуемой сыворотки от 1:2 до 1:256. В каждую лунку вносят по 0,1 мл вируссодержащего материала в 4 ГАЕ и оставляют при комнатной температуре на 20 мин. По истечении этого времени в каждую лунку добавляют по 0,1 мл 1%-ной взвеси эритроцитов кур и снова оставляют при комнатной температуре на 60 мин. Ставят 3 контроля: эритроциты и сыворотка, эритроциты и физраствор, эритроциты и вируссодержащий материал.
Учет результатов: - в 1-ых 5 лунках(эритроциты оседают на дно лунки в виде компактной точки), + 6, ++ 7, +++ 8. Контроли: -,-,+++. Титр антител в РЗГА-наименьшее их количество, способное полностью задержать гемагглютинацию, 1:64.
