Титрование противовирусных антител проводится путем
Основной опыт РЗГА (для определения антител в исследуемой сыворотке). В лунки пластмассовой панели разливают по 0,1 мл физиологического раствора. Затем в первую лунку вносят 0,1 мл исследуемой сыворотки и делают последовательные ее переносы. Из последней лунки 0,1 мл разведенной сыворотки выли вают в дезраствор. Таким образом, получают разведения исследуемой сыворотки от 1:2 до 1:256. В каждую лунку вносят по 0,1 мл вируссодержащего материала в 4 ГАЕ и оставляют при комнатной температуре на 20 мин. По истечении этого времени в каждую лунку добавляют по 0,1 мл 1%-ной взвеси эритроцитов кур и снова оставляют при комнатной температуре.
Одновременно ставят контроли: а) контроль сыворотки (0,1 мл разведенной 1:10 сыворотки крови и 0,1 мл 1%-ной взвеси эритроцитов кур);
б) контроль эритроцитов (0,1 мл 1%-ной взвеси эритроцитов кур и 0,1 мл физраствора); в) контроль вируса (0,1 мл антигена в 4 ГАЕ и 0,1 мл 1%-ной взвеси эритроцитов кур).
Панели встряхивают и после 60 мин контакта учитывают реакцию.
Учет результатов: - в 1-ых 5 лунках(эритроциты оседают на дно лунки в виде компактной точки), + 6, ++ 7, +++ 8. Контроли: -,-,+++. Титр антител в РЗГА-наименьшее их количество, способное полностью задержать гемагглютинацию, 1:64.
