Существуют простые, сложные и дифференциальные способы окрашивания микробов. При простой окраске обычно употребляют одну краску, чаще всего красную — фуксин, или синюю — метиленовый синий. Фуксин красит быстрее (1—2 мин.), метиленовый синий — медленнее (3—5 мин.). Фуксин приготовляют в виде концентрированного карболового раствора (фуксин Циля), очень стойкого и пригодного для окраски в течение многих месяцев. Метиленовый синий приготовляется заранее в насыщенном спиртовом растворе, который стоек и может долго храниться.
При сложных методах окраски мазков применяют два–три различных по цвету красителя, что позволяет дифференцировать микробы и выявить некоторые нюансы в деталях их строения. К таким методам относят окраску по Граму, Цилю–Нельсену, Нейссеру, Бурри–Гинсу, Романовскому–Гимзе и некоторые другие.
Для изучения морфологические особенностей клеток их окрашивают спиртовыми растворами основных (метиленовый синий, генциановый фиолетовый, фуксин) или кислых (эритрозин, эозин) красителей.
На окрашиваемом материале (субстрате) К. удерживаются благодаря образованию химических связей с субстратом. Единой классификации К. нет. По химических свойствам различают К. основные (у которых при диссоциации выделяются гидроксильные ионы), кислые (у них при диссоциации выделяются водородные ионы) и нейтральные. Кислые К. (в виде аниона) окрашивают вещества основной природы, основные К. (в виде катиона) окрашивают вещества кислотной природы. В клетках микроорганизмов имеются и кислотные, и основные группы — СООН и — NH2, поэтому они могут окрашиваться и основными, и кислыми К. Основные К. окрашивают объект интенсивнее в более щелочной среде, кислые — в более кислой. К. основной природы, наиболее часто употребляемые в микробиологии: красные — нейтральный красный, пиронин, сафранин, фуксин, гематоксилин, тионин; синие — виктория, метиленовый синий; фиолетовые — генциан фиолетовый, кристаллический фиолетовый, метиловый фиолетовый; зеленые — янус зеленый, метиловый зеленый, малахитовый зеленый; коричневые —везувин, хризоидин; черные — индулин и др. К. кислой природы: красные и розовые — кислый фуксин, эритрозин; черные — нигрозин; желтые — конго, пикриновая кислота, флуоресцин и др.
Для изучения морфологические особенностей клеток их окрашивают спиртовыми растворами основных (метиленовый синий, генциановый фиолетовый, фуксин) или кислых (эритрозин, эозин) красителей. Окраска по Граму (генцианвиолетом, раствором Люголя) имеет диагностическое значение: дрожжи и бактерии молочнокислые — грамположительные и окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, бактерии уксуснокислые — грамотрицательные и окрашиваются в красный цвет. Некоторые К. применяют для обнаружения в клетках органических веществ. Например, содержащиеся в клетках липиды окрашиваются раствором судана Ш (0,1 г Судана в 200 см3 95%-ного этилового спирта или в концентрированной молочной кислоте) в розовый цвет. Раствор Люголя (0,33 г йода кристаллического + 0,66 г йодистого калия -I- 100 см3 дистиллированной воды) окрашивает гликоген в красно-бурый цвет, а плазму клеток — в желтый. При окраске нейтральным красным или метиленовым синим волютин в вакуолях живых клеток дрожжей выпадает в виде ярких красных или синих шариков, а при окраске фиксированного препарата метиленовым синим волютиновые зерна приобретают фиолетовый или фиолетово-красный цвет. Употребление флуоресцентных К. (например, акридинового оранжевого) в сочетании с люминесцентной микроскопией позволяет различать живые и мертвые клетки микроорганизмов: первые окрашиваются в зеленый, вторые — в красный цвет.
