Вирусная диарея (болезнь слизистых оболочек) - инфекционная контагиозная болезнь крупного рогатого скота, характеризующаяся лихорадкой, воспалением и изъязвлением слизистых оболочек пищеварительного тракта и диареей.
Возбудитель - РНК-содержащий вирус, обладающий спиральным типом симметрии с величиной хода витка около 180 А. По сообщениям Гермодсона и Динтера (Hermodson, Dinter, 1962), Xaka (Huck, 1961), Шоопа и Вахендорфера (Schoop, Wachendorfer, 1963), величина вирусных частиц равна 30-40 ммк. По данным Бюрки (Btirki, 1965) и Лейнена с Веллемансом (Leunen, Wel-lemans, 1965), она равна 50 ммк, а вирус, выделенный в Италии Цилли (СПИ, 1967), имел величину вирионов около 57-58 ммк, Дутта и сотр. (Dutta et al., 1965), изучая вирус диареи под электронным микроскопом, установили, что он имеет сферическую форму, величина его равна 75-85 ммк. Однако, учитывая сообщения большинства исследователей, необходимо принять во внимание, что величина частиц вируса диареи колеблется в пределах 30-50 ммк.
Устойчивость. Вирус диареи может годами сохраняться при температуре ниже минус 20°. В культуральной жидкости при температуре минус 15° он сохраняет биологическую активность до года, а в крови, лимфатических узлах, селезенке и другом патологическом материале-до шести месяцев.Относительно устойчив возбудитель при положительных температурах. При 25° в течение суток он практически не снижает свою биологическую активность, а при 35° остается активным в течение 72 часов. По сообщениям Эндрюса (Andrewes, 1964) и Тейлора с сотр. (Taylor et al., 1963), прогревание при 56° приводит к полной инактивации вируса в течение 35 минут. Грачек (Grat-zek, 1961) считает, что существуют теплоустойчивые варианты этого возбудителя.Благодаря содержанию в вирионах липидов, вирус чувствителен к эфиру, хлороформу, трипсину и дезоксихолату. По даннымТейлора и Хака, имеются и эфироустойчивые штаммы. В кислой среде вирус быстро инактивируется. Так, в опытах Дитчфиль-да (Ditchfield, 1964) при рН 3,0 он погибал в течение четырех часов. Во внешних условиях возбудитель диареи, по-видимому, довольно устойчив, о чем свидетельствует его сохранение в экскретах до пяти месяцев.
Эпизоотология болезни. В естественных условиях к вирусной диарее восприимчив крупный рогатый скот. Панди с сотр. (Рап-dey et al., 1961) установили вирусную диарею среди буйволов, а Ричард и сотр. (Richards et al., 1956) и Цилли наблюдали заболевание оленей, характеризовавшееся обильным выделением слюны, носовыми истечениями и изъязвлениями слизистых оболочек пищеварительного тракта. Ромвари (Romvary, 1965) в Венгрии зарегистрировал данную болезнь среди косуль и выделил от них вирус диареи. О восприимчивости других животных сведений нет, хотя Френч (French, 1962) в Австралии обнаружил антитела к вирусу диареи в крови овец (16%) и свиней (20%). Шиотт и Хильдгард (Schiott, Hyldgaard, 1962) выделили вирус диареи от крупного рогатого скота и человека и обнаружили у них антитела к данному вирусу.К вирусной диарее наиболее восприимчивы животные в возрасте от шести месяцев до двух лет независимо от пола. Более молодые телята и животные старше двух лет болеют значительно реже. Ремсей и Чиверс (Ramsey, Chivers, 1957) наблюдали заболевание среди 3-7-летних коров, а Шиппер и Эвелет (Schipper, Eve-leth, 1957) зарегистрировали данную инфекцию среди телят в возрасте 16-96 часов. В отдельных случаях даже 8-месячные плоды имели поражения слизистых оболочек.
Источником инфекции служат больные животные. Бэгель (Bogel, 1964) считает, что в ГДР резервуаром вируса диареи являются овцы, так как в их сыворотках часто обнаруживают специфические антитела к вирусу диареи. В зависимости от стадии болезни возбудитель из организма выделяется с калом, мочой, слюной, носовыми и глазными секретами, а также с экссудатом воспаленных очагов. При этом вирусоносительство может быть довольно продолжительным. Гутекунсту и Малмквисту (Gutekunst, Malmquist, 1963) удавалось выделять вирус из крови телят в течение четырех месяцев после их переболевания.Несмотря на широкое распространение, пути и способы передачи инфекции в естественных условиях мало изучены. Причиной эпизоотии часто является скопление животных, среди которых есть вирусоносители или животные в инкубационном периоде болезни. Шиппер с сотр. считают, что распространению инфекции может способствовать обслуживающий персонал.Болезнь чаще протекает в виде энзоотии. Бюрки и Герман (Biirki, Germann, 1964) установили, что при высоком проценте инфицирования животных в стаде болезнь протекает без видимых клинических признаков.Вирусную диарею можно наблюдать в течение всего года и в озникновении вспышек не отмечено определенной сезонности, хотя в холодное время года число их увеличивается. В одних случаях большинство вспышек зарегистрировано осенью и зимой, в других - весной. Возможно, это объясняется климатическими условиями страны. Существенную роль в исходе болезни играют содержание животных, биологическая характеристика штамма, степень инфицирования стада и другие факторы.
Патогенез. Попав в организм, вирус поступает в кровеносную (лимфатическую) систему и, размножаясь, вызывает септицемию и изменения в стенках кровеносных сосудов. Иногда можно наблюдать дегенерацию мышечной оболочки артериол в подслизистой сычуга, тонкого и толстого отделов кишечника.Морфологический состав крови, как ответная реакция на внедрение и размножение вируса, изменяется раньше, чем появляются первые клинические признаки болезни. Уже в первые 1-2 дня после введения вируса отмечается резкая лейкопения (до 2-3 тыс.), выражающаяся в уменьшении нейтрофилов и эозинофилов. Морфологические изменения крови указывают на патологические и воспалительные процессы в кроветворных органах. В это время отмечается незначительный подъем температуры и удается обнаруживать в крови вирус, который может сохраняться в организме длительное время после переболевания.В лимфатических узлах субкапуслярный синус обычно растянут и заполнен лейкоцитами, а иногда во внешнем участке коры отмечается интенсивная инфильтрация нейтрофилов. Это ведет к заметному увеличению лимфатических узлов. Подобные изменения бывают в селезенке и кроветворных органах.В связи с повреждением кровеносных сосудов происходит гиперемия и набухание слизистых оболочек, особенно пищеварительного тракта. Под действием вируса слизистые некротизируются, вследствие чего образуются мелкие эрозии. В дальнейшем процессе разрушения слизистых оболочек и в образовании эрозий и язв принимает участие различная микрофлора пищеварительного тракта (бактерии, грибы). Эти вторичные процессы на слизистых ведут к интоксикации организма и его истощению.
Симптоматика. Инкубационный период продолжается 6-9, а иногда 2-14 дней. Клиническая картина болезни очень разнообразна. Различают латентное, подострое, острое и хроническое течение болезни.Латентное течение. Болезнь протекает без видимых клинических признаков, и переболевание устанавливают, обнаруживая в сыворотке крови специфические антитела. При этом антитела часто находят также и у клинически здорового крупного рогатого скота неблагополучных хозяйств, где ни разу не регистрировали данное заболевание. Например, Смит и сотр. (Smith et al., 1961) обнаруживали антитела у животных 31 хозяйства, в то время как болезнь клинически была зарегистрирована только в двух. Подобные результаты получил Либерман (Liebermann, 1966), который в при-балтийской области ГДР у 23,8% здоровых животных обнаружил антитела к вирусу диареи.Подострое течение, характеризуется внезапностью, подъемом температуры тела па 1-2°, учащенными сердцебиением и дыханием и частичным или полным отсутствием аппетита. У животных могут незначительно поражаться слизистые оболочки ротовой полости, а у некоторых появляются носовые истечения, кашель и кратковременная (12-24 часа) диарея. Джиллеспи и сотр. (Gillespie et al., 1961) наблюдали вирусную диарею, сопровождающуюся лихорадкой и лейкопенией. Понос и поражение слизистых оболочек отсутствовали. Иногда у больных животных наблюдают повышение температуры тела, гиперемию и цианоз слизистых оболочек носовой и ротовой полостей, атонию и понос. Флинн (Flinn, 1959) описал вирусную диарею, продолжавшуюся 2-4 дня и выражавшуюся проявлением поноса и снижением удоя.Острое течение. Симптомы проявляются внезапно и выражаются лихорадкой (39,5-42,4°), умеренной или сильной депрессией, тахикардией, учащением дыхания и потерей аппетита. Температура быстро понижается до нормальной (12-48 часов). С подъемом температуры регистрируют лейкопению, часто сопровождающуюся относительным лимфоцитозом. Вскоре начинают выделяться серозные носовые истечения, которые в дальнейшем становятся слизистыми или слизисто-гнойными. У некоторых животных появляется жесткий и сухой кашель. В тяжелых случаях вся морда покрывается толстым слоем липких выделений, засыхающих в виде корочек, под которыми в дальнейшем образуются эрозии. Часто из ротовой полости выделяется вязкая, нитью свисающая слюна. Катаральный конъюнктивит и сильное слезотечение иногда сопровождаются начинающимся с центра помутнением роговицы и па-нофталмией Слизистая оболочка носа гиперемирована; на губах, деснах, спинке и краях языка встречаются округлые или продолговатые с резко ограниче
нными краями эрозии. При осложнении секундар-ной инфекцией образуются язвы, которые покрываются гнойным или казеозным детритом (рис. 1). Поражения в ротовой полости наиболее заметны при появлении первых случаев болезни в стаде. Часто подобные дефекты можно обнаружить на носовом зеркальце, ноздрях и во влагалище.В некоторых стадах главным клиническим признаком болезни служит хромота, которая появляется в результате воспаления хрящей, входящих в состав скелета конечностей. хМногие животные хромают в течение всего периода болезни, а иногда даже некоторое время и после выздоровления. У отдельных животных эрозии или язвы появляются в межкопытной щели. В течение лихорадочного периода кал оформлен и нередко содержит сгустки крови и слизьЧерез несколько дней появляется диарея, которая продолжается непрерывно или перемещается в течение 1-4 недель. Кал жидкий и зловонный, с наличием пузырьков газа. Диарея ведет к обезвоживанию и кахексии.В затяжных случаях болезни изменяется кожа. В области шеи, плеч, колен, промежности и седалищных бугров она сморщивается, становится жесткой и покрывается перхотью, как при гиперкератозе. На слизистой оболочке препуция, на основании мошонки и на вымени появляются эрозии и засохшие корочки экссудата. Иногда отмечаются обширные участки выпадения волос. Больные животные сильно худеют и в течение месяца могут терять в весе до 25%. У коров снижается продуктивность и возможны аборты.
Хроническое течение. Клинические признаки развиваются медленно, и болезнь трудно диагностировать. Животные постепенно истощаются, у них появляется постоянная или перемежающаяся ди-аоея. У некоторых животных она отсутствует. Другие признаки болезни чаще всего не проявляются. Животные могут долго болеть (до шести месяцев) и, как правило, погибают. Хронически болезнь протекает у животных при недостаточном кормлении, неудовлетворительных условиях содержания, у пораженных желудочно-кишечными гельминтами, а также в хозяйствах, где раньше болезнь протекала остро.Экспериментально воспроизведенное заболевание протекает с характерными, хотя и слабо выраженными клиническими, гематологическими и патологоанато-мическими признаками, наблюдаемыми при естественном течении болезни. Болезнь обычно протекает легко, принимая иногда хроническое течение и редко обусловливая гибель животного. Для экспериментально вызванной
вирусной диареи характерны двухфазная температурная реакция, которая отмечается па 2- 4-й и 7-10-й дни после заражения, и резкая лейкопения в период между температурными взлетами (рис. 2). Некоторые штаммы не вызывают заметного повышения температуры. Иногда экспериментально зараженные животные перебо-левают без видимых клинических признаков.
Прогноз. Процент падежа среди заболевших животных может быть различным не только в разных странах, но и в одной стране и даже в различных группах животных одного хозяйства. Для исхода болезни имеет значение штамм вируса, индивидуальные особенности и условия содержания животных, характер вспышки и др. Отмечено, что заболеваемость, обусловленная штаммом Индиана, составляет 80-100%, штаммом Нью-Йорк - 33-88% при летальности от 4 до 10%, а иногда до 50%. Штамм Орегон C24V и близкородственные ему могут вызвать заболевание 100% животных при смертельности в пределах 1-40%. При хроническом течении болезни может заболевать 10-20%, а погибать до 100% заболевших. Иногда в стаде заболевало около 2% животных, и все они погибали.
Патологоанатомические изменения. Характерными патологическими изменениями являются геморрагии, гиперемия, отек, эрозии и язвы слизистых оболочек на всем пути пищеварительного тракта. На слизистых оболочках пищевода, тонкого отдела кишечника и сычуга иногда отмечаются обширные некрозы.В органах дыхания изменения незначительны и выражаются в появлении эрозий в области ноздрей и носовых ходов, а также в скоплении слизистого экссудата в гортани и трахее. Иногда на слизистой оболочке трахеи встречаются геморрагии в виде потехий и кровоподтеков. В легких выражена эмфизема.В кровеносных сосудах отмечают субэпикардиальные и субэндо-кардиальные геморрагии. Лимфатические узлы чаще без видимых изменений, но иногда они сильно увеличены и отечны. Почки увеличены, отечны, анемичны, под капсулой видны точечные кровоизлияния; часто наблюдается гиперемия и жировое перерождение мозгового слоя почек. В печени отчетливо выражены различной величины очаги некроза или жировой дегенерации, вследствие чего она увеличена и имеет оранжево-желтый цвет. Желчный пузырь воспален, а иногда в нем находят геморрагии и эрозии.Если болезнь затягивается, то в области шеи, промежности и плеч волос теряет блеск, кожа утолщается и покрывается желтоватыми некротическими корками. Иногда развивается гнойный дерматит. Эрозии и язвы встречаются и в межкопытной щели.
Диагноз. Вирусная диарея может протекать с преобладанием признаков диареи или поражения слизистых оболочек. Симптомы болезни, данные гематологического исследования, характер патологических изменений и эпизоотологические данные позволяют поставить только предварительный диагноз, поскольку вирусная диарея может напоминать многие другие болезни: чуму, инфекционный ринотрахеит, инфекционный язвенный стоматит, грибковый стоматит, транспортную лихорадку, ящур, алиментарные отравления и др. Эти данные необходимо подтверждать объективными методами лабораторного исследования. К вирусу диареи не чувствительны морские свинки, золотистые хомяки, белые мыши и куриные эмбрионы независимо от метода заражения. Некоторые штаммы вызывают заболевание крольчат в возрасте до одного месяца. В организме взрослых кроликов вирус размножается, не вызывая появления клинических признаков.
Выделение и идентификация вируса. Для проведения вирусологических исследований берут кровь от больных животных, а от трупов- селезенку, мезентериальные лимфатические узлы, пораженные участки слизистых, оболочек и другие органы и ткани.
Вирус выделяют на культурах клеток почек теленка или ягненка, в которых он вызывает характерные цитопатогенные изменения (рис. 3). Можно использовать культуру клеток тестикулов крупного рогатого скота. Идентификацию возбудителя проводят в реакции нейтрализации на. культурах клеток со специфическими сыворотками к эталонному или известному штамму вируса диареи. Диагностические сыворотки преимущественно получают па кроликах и реже на телятах.Размножение слабовирулентных или нецитопатогенных штаммов обнаруживают при помощи метода иммунофлуоресценции или заражая исследуемым материалом телят, от которых в реакции нейтрализации на культуре клеток исследуют парные сыворотки с известным цитопатогенным штаммом. Сыворотки получают до заражения и примерно через 3 недели после заражения. Таким же-образом испытывают сыворотки от животных в неблагополучном очаге. Диагностическим признаком положительной реакции является наличие или повышение титра антител во второй пробе сыворотки. Этот метод облегчает постановку диагноза при легком течении болезни.Одним из быстрых и простых методов лабораторной диагностики вирусной диареи является реакция диффузионной преципитации в агаровом геле (РДП). Для исследования берут в первую очередь измененные участки слизистых оболочек пищеварительного тракта и мезентериальные лимфатические узлы. Однако этим методом не всегда удается обнаружить антиген. Например, Дарбишайр (Derbyshire, 1962) при летальном исходе обнаруживал антиген в 86% случаев, при вынужденном убое- в 14, а клинически переболевшие животные реагировали в пределах 25-30%. Поэтому РДП может быть использована для групповой диагностики болезни.
Дифференциальный диагноз. Вирусную диарею следует дифференцировать от некоторых других болезней крупного рогатого скота. Чума клинически не отличается от остро протекающей вирусной диареи. Отличительными признаками ее являются: отсутствие хромоты и поражений на спинке языка, восприимчивость мелких жвачных животных и, главное, результаты исследования патологического материала в серологических реакциях (РСК, РДП).Транспортная лихорадка наступает после транспортировки животных и характеризуется отсутствием на ранней стадии болезни поражений слизистых оболочек ротовой полости, хромоты, а также характерной диареи. Основные поражения локализуются в органах дыхания.
Инфекционный ринотрахеит протекает без поражений слизистых оболочек пищеварительного тракта и диареи, с преимущественными изменениями в органах дыхания (ринит, фарингит, бронхит). Исследования сывороток крови в реакции нейтрализации позволяют надежно дифференцировать эти болезниЗлокачественную катаральную лихорадку отличает от вирусной диареи то, что для лихорадки характерны явления ярко выраженного конъюнктивита и почти постоянно периферического кератита (при диарее начинается центральное помутнение роговицы). Низкая заражаемость, наличие признаков поражения нервной системы (оцепенение, реже возбуждение) и высокая смертельность присущи катаральной горячке. Экспериментальное заражение овец, коз, кроликов, морских свинок и мышей, а также обнаружение в нервных клетках мозга телец-включений позволяет правильно дифференцировать эти две болезни.Ящур отличается от вирусной диареи очень высокой контагиоз-ностью, необычайной быстротой распространения, характерным афтозным процессом на слизистой оболочке ротовой полости и восприимчивостью к нему крупного рогатого скота всех возрастов и Других парнокопытных животных. Лабораторные исследования с использованием серологических методов (РСК, РН) и заражение лабораторных животных позволяют быстро и правильно диагностировать болезнь.При паратуберкулезе отмечается низкая заражаемость, общая хроническая слабость животных, преимущественное поражение взрослого поголовья крупного рогатого скота, наличие кислотоупорных бактерий в кале или в соскобах со слизистой оболочки кишечника, характерная реакция на паратуберкулин, а также результаты РСК.Инфекционные стоматиты, как правило, обладают более широким спектром патогенности для сельскохозяйственных и лабораторных животных. Кроме того, при них значительно реже наблюдается поражение конечностей и характерные для вирусной диареи однотипные поражения слизистых оболочек.Катаральная лихорадка крупного рогатого скота (блютангопо-добные заболевания) в отличие от вирусной диареи протекает в основном доброкачественно, и для ее распространения необходимо наличие переносчиков - кровососущих насекомых. Низкая заболеваемость (0,5-2,0%) и весьма незначительный падеж, высокая чувствительность овец и результаты исследований в РСК позволяют дифференцировать эти болезни.Гиперкератозы и алиментарные отравления не контагиозны.При диагностике вирусной диареи следует обратить внимание на возможность смешанного течения инфекции. В частности, отмечены частые энзоотии вирусной диареи совместно с инфекционным ринотрахеитом, парагриппом-3, а также с участием адено- и энтеровирусов.Лечение. Специфических средств лечения нет. Иногда целесообразно применение симптоматических средств. При диарее используют вяжущие средства, позволяющие уменьшить потерю воды и солей и таким образом значительно снизить потерю в весе. Применение антибиотиков и сульфаниламидных препаратов позволяет бороться с микроорганизмами, которые могут проникать в организм через поврежденный эпителий пищеварительного тракта.Иммунитет. При вирусной диарее иммунитет мало изучен. Установлено наличие иммунологически различных штаммов ее возбудителя. Наблюдения отдельных исследователей показали, что пере-болевание создает длительный иммунитет и повторное заражение наступает редко. В частности, Лейнен и Веллеманс (Leunen, Welle-mans, 1065), а также Притчард (Pritchard, 1963) сообщили, что телята, перенесшие экспериментальную инфекцию, были резистентны к повторному заражению в течение 12-16 месяцев. Другие сообщения свидетельствуют, что даже при заражении животных гомологичным штаммом иммунитет не превышает 4-5 месяцев, рецидивы болезни отмечаются даже через 3-4 месяца. Видимо, иммунитет при вирусной диарее чаще продолжительный.Профилактика и меры борьбы. В неблагополучных хозяйствах и угрожаемых районах в некоторых странах с целью специфической профилактики рекомендуют использовать вакцину, изготовленную из вируса диареи, ослабленного на кроликах или аттенуи-рованного в культуре клеток. При двукратном внутримышечном введении она создает надежный иммунитет до шести месяцев.В отдельных случаях рекомендуют применять специфическую лечебную сыворотку или кровь переболевших животных. В частности, Шимони и сотр. (Simoni et al., 1965) в Венгрии изготовили на телятах эффективную сыворотку, которая в разведении 1 : 1024 нейтрализовала не менее 1500 ТЦД50 вируса. Однако до настоящего времени вакцины и сыворотки против вирусной диареи применяют редко, в основном для защиты ценных животных.Большое значение в проведении мероприятий при данной болезни имеет опыт ветеринарных специалистов, так как единых правил ни в одной стране пока нет. Если диарея протекает остро, злокачественно, профилактика и меры борьбы основываются на изо-.ляции и убое больных животных и дезинфекции мест их содержания и средств транспортировки щелочью или фенолом. В неблагополучных и угрожаемых районах ограничиваются движение скота и его перегруппировка. Карантинные мероприятия не разработаны.
