1. Делаем первичный посев :
- на агар Чапека
- на влажные камеры(как правило для грубых кормов) температ 22-25 гр на 10 дней термостат при посеве на среду чапека.
При посеве на влажные камеры на дно кладется тонкая вата а сверху фильтровальная бумага .Перед посевом необходимо добавлять раствор Ван Итерсона. Затем делаем нарезку из кормов. Температура 22-25 на 10 дней.
2. Делаем вторичный посев (бак.петлей пересев колоний без примесей)
3. Делаем разведения . В пробирку добаляем 9 мл дистил воды и 1 гр корма. Перемешиваем.
4. Делаем ряд послед. Разведений и в чашу петри с агаром Чапека.
Есть два вида поражения грибами:
- заспорение ,когда спор обнаруживаем только на поверхности,и они не проникли внутрь корма.
- загрязнение – споры грибов внутри.
Зерен: берем по 50 зерен и помещаем в 2 марлевых мешочка .помещаем в стакан с 1% р-ом формалина, затем мешочек промываем в дистилированой воде. Если зерна стали чище, значит они были заспорены. Другой мешочек не помещаем в формалин.
Затем осуществляем посев на среду Чапека Либо разрезаем зерно пополам, после обработка формалином, и делаем посев.
Определение токсичности:
Используют разнее биологические модели(чаще инфузории)
2 способа
1) Берутся пенициллиновые флаконы вносим по 0,1 мл культуры инфузорий + 1 мл экстракта корма
Экстракт делается: корм измельч 20 гр и помещают в фарфор чашку, заливают 20 мл медицинск эфира или ацетона, доводят до консист кашецы.
Затем наблюдают под микроскопом:
- ничего не происходит - не токсичен
- инфузории замирают и на них появляются бугры - малотоксичен
- инфузории начинают кувыркаться - средне токсичен
- инфузории взрываются - сильная токсичность корма.
2) Используются луночные микроаквариумы ( 5 рядов по 11 отверстий)
В эти луночки вносят культу инфуз затем добавл экстракт кормов. Наблюдаем.
Также в кач-ве био моделей используются рыбки - гуппи: банка + 5-10 рыбок + экстракт корма. Наблюдаем. Если ничего не происходит - не токсичен, если умерла 1 рыба-малотоксичен, если 3-средне,если все - сильная токсичность.
Так же в каче –ве моделей использую куриные эмбрионы на 8-9 день. Делают экстракт кормов и вводят 1 мл в эмбрион . Делают контроли - вводят эмбриона дистилл стерильн воду или растит масло. На 21 день развития вскрывают эмбрион и оценивают.
Исп белых мышей- экстракт вводят подкожно 5 мышам в область бедра
Делают контроль 5 мышам вводим подкожно в обл бедра дист воду или масло растит.
Оцениваем.
Использут белых кроликов. На них ставят кожную пробу. У кролика выстриг на лопатке или бедре шерсть в виде квадратика .Делаем экстракт корма и шпателем мажем в эту выстриженную область. Наблюдаем. Если ничего не происх-не токсичен, если язвочки-малотоксичен, если утолщение кожи, язвы ,воспаление - средне оксичен, если некроз-сильно токсичесн.
Раньше была офтальм проба на кролике - экстракт размешивают в дистил. стерильн воде и наносят на конъюнктиву глаза. Наблюдаем.
Так же можно использ алимент пробы на молодняке сельскохоз ж-х - скармливают корма молодняку и наблюдают.
